V procese konštrukcie bunkovej línie sa náhodná integrácia týka náhodného vloženia exogénnych génov do ľubovoľných lokusov hostiteľského genómu.Náhodná integrácia má však obmedzenia a nedostatky a cielená integrácia ju pre svoje výhody postupne nahrádza.Tento článok poskytne podrobné vysvetlenie, prečo cielená integrácia nahrádza náhodnú integráciu a rozoberie jej dôležitosť pri konštrukcii bunkovej línie.
I. Flexibilita a presnosť
Cielená integrácia ponúka vyššiu flexibilitu a presnosť v porovnaní s náhodnou integráciou.Výberom špecifických integračných miest môžu byť exogénne gény presne vložené do požadovaných oblastí hostiteľského genómu.Tým sa zabráni zbytočným mutáciám a génovej interferencii, vďaka čomu je konštrukcia bunkovej línie kontrolovateľnejšia a predvídateľnejšia.Naproti tomu náhodná integrácia môže viesť k neúčinným inzerciám, multikópiám alebo nestabilným kópiám, ktoré obmedzujú ďalšiu optimalizáciu a modifikáciu bunkových línií.
II.Bezpečnosť a stabilita
Cielená integrácia poskytuje vyššiu bezpečnosť a stabilitu pri konštrukcii bunkovej línie.Výberom bezpečných prístavných miest a iných konzervatívnych integračných lokusov sa minimalizujú potenciálne vplyvy na hostiteľský genóm.V dôsledku toho inzercia exogénnych génov nevedie k abnormálnej expresii alebo genetickým mutáciám v hostiteľovi, čo zaisťuje stabilitu a biologickú bezpečnosť bunkovej línie.Naproti tomu náhodná integrácia môže spôsobiť neočakávané preskupenia génov, stratu génov alebo abnormálne bunkové správanie, čím sa zníži úspešnosť a stabilita konštrukcie bunkovej línie.
III.Ovládateľnosť a predvídateľnosť
Cielená integrácia ponúka väčšiu ovládateľnosť a predvídateľnosť.Presnou kontrolou integračných miest a počtu exogénnych génov možno dosiahnuť špecifické genetické modifikácie v bunkových líniách.To pomáha znižovať irelevantné variácie a genetické interferencie, vďaka čomu je konštrukcia bunkovej línie lepšie kontrolovateľná, opakovateľná a škálovateľná.Na druhej strane, výsledky náhodnej integrácie nemožno presne kontrolovať, čo vedie k bunkovej diverzite a neistote, čo obmedzuje riadenú modifikáciu a vývoj špecifických funkcií.
IV.Efektívnosť a efektívnosť nákladov
Cielená integrácia preukazuje vyššiu efektivitu a nákladovú efektívnosť.Keďže cielená integrácia sa vkladá priamo do požadovaného lokusu, vyhýba sa časovo náročnému a pracnému procesu skríningu veľkého počtu bunkových klonov obsahujúcich cieľový gén.Okrem toho môže cielená integrácia znížiť potrebu výberu tlakov, ako sú antibiotiká, čím sa znížia náklady a čas potrebný na konštrukciu bunkovej línie.Na rozdiel od toho náhodná integrácia často vyžaduje skríning veľkého počtu klonov a je náročnejšie skrínovať degradačné alebo inaktivačné mutácie v špecifických génoch, čo vedie k nižšej účinnosti a vyšším nákladom.
Záverom možno povedať, že cielená integrácia postupne nahrádza náhodnú integráciu v konštrukcii bunkovej línie vďaka jej vyššej flexibilite, presnosti, bezpečnosti, stabilite, ovládateľnosti, predvídateľnosti, účinnosti a nákladovej efektívnosti.S neustálym pokrokom a vývojom technológie bude cielená integrácia ďalej rozširovať svoje aplikácie v konštrukcii bunkových línií a genetickom inžinierstve, čím poskytne viac možností a príležitostí pre biotechnologický výskum a priemyselnú výrobu.
Čas odoslania: 26. júna 2023