1.Výber správnej bunkovej línie
Pri výbere vhodnej bunkovej línie pre váš experiment zvážte nasledujúce kritériá:
a.Druhy: Bunkové línie okrem človeka a primátov majú zvyčajne menej obmedzení biologickej bezpečnosti, ale nakoniec váš experiment určí, či použiť kultúru konkrétneho druhu.
b.Funkcie: Aký je účel vášho experimentu?Napríklad bunkové línie odvodené z pečene a obličiek môžu byť vhodnejšie na testovanie toxicity.
c. Obmedzené alebo kontinuálne: Hoci výber z obmedzenej bunkovej línie vám môže poskytnúť viac možností na vyjadrenie správnej funkcie, kontinuálne bunkové línie sa vo všeobecnosti ľahšie klonujú a udržiavajú.
d.Normálne alebo transformované: Transformované bunkové línie majú zvyčajne vyššiu rýchlosť rastu a vyššiu účinnosť naočkovania, sú kontinuálne a vyžadujú menej séra v kultivačnom médiu, ale ich fenotyp prešiel trvalými zmenami prostredníctvom genetickej transformácie.
e. Podmienky a charakteristiky rastu: Aké sú vaše požiadavky na rýchlosť rastu, hustotu saturácie, účinnosť klonovania a schopnosť rastu suspenzie?Napríklad na expresiu rekombinantných proteínov vo vysokých výťažkoch možno budete musieť vybrať bunkové línie, ktoré majú rýchle rýchlosti rastu a schopnosť rásť v suspenzii.
f. Ďalšie kritériá: Ak používate obmedzenú bunkovú líniu, je k dispozícii dostatok zásob?Je bunková línia plne charakterizovaná, alebo si to musíte overiť sami?Ak používate abnormálnu bunkovú líniu, existuje ekvivalentná normálna bunková línia, ktorú možno použiť ako kontrolu?Je bunková línia stabilná?Ak nie, aké ľahké je naklonovať ho a vytvoriť dostatok zmrazených zásob pre váš experiment?
2. Získajte bunkové línie
Môžete si vytvoriť svoju vlastnú kultúru z primárnych buniek, alebo si môžete zvoliť nákup zavedených bunkových kultúr od komerčných alebo neziskových dodávateľov (tj bunkových bánk).Renomovaní dodávatelia poskytujú vysokokvalitné bunkové línie, ktoré boli starostlivo testované na integritu a zabezpečujú, že kultúra je bez kontaminantov.Odporúčame nepožičiavať si kultúry z iných laboratórií, pretože majú vysoké riziko kontaminácie bunkových kultúr.Bez ohľadu na jeho zdroj sa prosím uistite, že všetky nové bunkové línie boli testované na kontamináciu mykoplazmami predtým, ako ho začnete používať.
Čas odoslania: Feb-01-2023